免疫印迹和免疫共沉淀结果图分析

ningxueqin528

　　IB每次只能检一种蛋白，所以要检两种蛋白的话，就需要检两次，一次是用是VSV抗体，一次是用标签抗体Flag；IP是共沉淀，多种蛋白均是带Flag标签表达的，所以一个Flag可以检出多种蛋白。

　　[url=http:///www.pall.cn/zh_cn/laboratory/protein-sample-prep-detection/western-blotting.html]免疫印迹[/url]分析下图B哈，图B被分成3个部分，先看最上面的一条，意思是，RIP1、RIP2、RIP3、RIP4和cardif这几个蛋白都融合了一个标签蛋白Flag，用Flag的抗体做IP后，再用VSV的抗体做IB，所显示出的条带。可以看到，只用Flag标签蛋白抗体做IP，再用VSV抗体做IB是检不出VSV条带的；而用RIP1、RIP2、RIP3、RIP4和cardif这标签蛋白IP后再IB可以检到不浓度的VSV蛋白，说明了VSV与这5个蛋白有不同浓度的相互作用。图B中间的部分意思是，用flag标签抗体做IP后，产物用Flag抗体做IB有不同大小的条带，说明IP过程是成功地将Flag标签融合蛋白富集纯化的。有的条带不只一条，可能蛋白分解或抗体不特异吧。