分子生物学试剂小试剂大作用培养细胞的关键

ciluanlan

　　一、万物的生长离不开水，[url=http:///www.illumina.com.cn/products/by-type/molecular-biology-reagents.html]分子生物学试剂[/url]细胞也是一样的，若要它生长，必须要用新鲜的双蒸水，不含任何杂质和有离子等成分。
　　二、PBS（也可用BBS、如：HanksD-Hanks液配置）-此产品主要用于免疫组化染色时组织或细胞的漂洗。Sciencell的DPBS（SicenCellNo.0303）是一种无毒、无渗合物的缓冲液，它不包含Ca2+,Mg2和酚红并且通过0.2μm过滤消毒，可用于冲洗细胞而不会造成损伤。
　　三、胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。分子生物学试剂不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样，胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在PH值为8.0，温度为37度时，胰酶溶液的作用能力qiang。所以使用胰酶时。应当把握好时间，浓度和温度。因Ca2+,Mg2，血清和蛋白质会降低胰酶的活性，所以配置胰酶时尽量避免使用含有这些物质的水剂。sciencell胰酶（SCIENCELLNo.0103）含有0.25%EDTA，(EDTA)是一种螯合剂，能螯合Ca+2、Mg+2等金属离子，促进胰蛋白酶化反应。（ScienCellNo.0183）0.05%胰蛋白酶加EDTA溶液(T/E)是一种无菌、磷酸盐和缓冲盐水溶液。此胰酶适用于原代细胞的消化。终止消化时，可用含血清的培养基或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞产生的作用。
　　四、内皮细胞涉及多个血管生物学的范畴，是众多科研研究的热点，它不仅能完成血浆和组织液的代谢交换，并且能合成和分泌多种生物活性物质，以保证血管正常的收缩和舒张，起到维持血管张力，调节血压以及凝血与抗凝平衡等特殊功能，进而保持血液的正常流动和血管的长期通畅。抗凝血材料表面内皮细胞化，可以减少血栓的形成和血小板激活。原代的内皮培养除了需要特制的内皮细胞完全培养基外在培养的时候还需要使用包被液，以促进细胞的贴壁和增殖能力，能更大量的得到更多的细胞。ScienCell牛血浆纤维连接蛋白直接从牛血浆纯化而来，未经过任何化合物干扰，使用可让细胞更自然的生长。
　　五、原代细胞冻存很关键，因为一不留神就会复苏不活，一冻回到解放前，DMSO是常用的冻存细胞的试剂，但是因为其具有挥发性，毒性，不好掌控，而导致很多科研者在细胞冻存之后自我感觉冻存没有问题，但是复苏起来却一个活细胞也见不着。为了避免这种尴尬的问题出现，sciencell细胞冻存液专为人源及动物源细胞冻存提供，此产品含DMSO、胎牛血清等细胞内外保护剂，在冷冻保存过程中进一步提高细胞活力。